Proteinlerin Elektroforetik Saflaştırılması – 2

KAĞIT ELEKTROFOREZİ

Düşük molekül ağırlıklı maddelerin ayrılmasında tercih edilir. Temel avantajı inceliği ve mekanik sağlamlığıdır. İnce destek ortamında tespit edilebilir bir bölge oluşturmak için kalın destek ortamından daha az materyal kullanılır. Az miktarda örneğin mevcut olduğu durumlarda yararlıdır. Bu yöntem ile amino asit gibi küçük moleküller ayrılabilir. Nötral moleküller uygulama süresince hareket etmez. Amino asitlerin net yükü, kullanılan tamponun pH değerine bağlı olduğu göz önünde bulundurulmalıdır. 

Şekil: Kağıt Elektroforezi Düzeneği

Bu metot, günümüzde protein saflaştırmada pek kullanılmamaktadır.

Uygulaması:

– Kağıt bant, tampon çözeltisine batırılıp tamamen ıslanması sağlanır.

– Örnek, kağıt bantın ortasına damlatılır.

– Kağıt bantın her iki ucu, elektrik alanın uygulandığı tampon çözeltisinin içine bandırılır.

– 100-1000 V arasında bir değerde DC potansiyeli uygulanır (akım miliamper değerde)

– Yeterli zaman geçtikten sonra kağıt şerit alınarak kurutulur.

– Gerekli ise uygun boyama ajanları ile boyanıp oluşan bantlar görüntülenebilir.

Sonraki Yazı: Proteinlerin Elektroforetik Saflaştırılması 3: Selüloz Asetat Elektroforezi

Kaynaklar

Lütfen Login yada Register gizli linkleri görebilmek için

Rıdvan

Yıldız Teknik Üniversitesi'nde Doktora yapmakta.

Bir Cevap Yazın

E-posta hesabınız yayımlanmayacak. Gerekli alanlar * ile işaretlenmişlerdir